Megszűnhet az Antarktiszról a dzsungelbe közlekedő különvonat, ennek oka a vasúti sínek leromlása. Az állatok attól tartva, hogy elveszítik az egyetlen szállítóeszközt, amely lehetővé teszi számukra az utazást, Diegohoz fordultak segítségért a Go Diego Go! Diego's Railroad Rescue. A fiú készen áll a segítségre, bevonva téged terve végrehajtásába. Ez magában foglalja az út javítását, de először az összes állatot a kocsikba kell helyeznie. Az utasok vállalják, hogy csak saját fajtájuk társaságában utaznak, ezért külön kocsi van a pingvinek, szarvas, medve stb. Amikor az összes állatot elhelyezték, a vonat megkezdi az útját, és minden megálló előtt össze kell állítania az utat, mint egy kirakós játékot úgy, hogy a Go Diego Go egyes szakaszait elforgatja! Diego's Railroad Rescue.
